Rendimiento sólido

Un objetivo clave de añadir un colorante de viabilidad al diseño de paneles es permitir la discriminación de las células muertas en las ventanas de selección posteriores.  Las células muertas se unen a los anticuerpos de manera no específica, lo que puede sesgar el análisis de la población. Si el reactivo pierde efectividad, se reduce la tinción, lo cual conduce a que más células muertas parezcan estar vivas. O si la tinción se aumenta de forma aberrante, más células aparecerán muertas.  Se requieren reactivos estables y consistentes para un rendimiento de ensayo sólido.

Beckman Coulter caracteriza por completo la calidad de nuestros reactivos.  Múltiples operadores prueban múltiples lotes de cada reactivo para determinar la concentración de tinción y el tiempo de incubación recomendados.  Cada lote nuevo se evalúa para garantizar que se cumplen los parámetros de control de calidad establecidos.

 

ViaKrome 405 ViaKrome 561 ViaKrome 638 ViaKrome 808
Ensayo 1 19,6 19,8 21,2 15,5
Ensayo 2 19,3 23,9 21,8 17,9
Ensayo 3 21,0 20,6 22,9 17,0
Ensayo 4 17,4 24,0 17,8 16,3
% promedio de células muertas 19,3 22,1 20,9 16,7
SD 1,5 2,2 2,2 1,0
CV % 7,6 % 9,9 % 10,6 % 5,9 %

 

Precisión del ensayo. Se tiñó una mezcla de células Jurkat y de células Jurkat estresadas por calor (55 °C durante 10 minutos) con el colorante de viabilidad fijable ViaKrome indicado.  Las muestras se adquirieron inmediatamente después de la tinción (n = 4).  La población de células muertas se indica como porcentaje y se indica el análisis estadístico de la variación.  El CV del ensayo osciló entre el 5,9 y 10,6 %.

Estabilidad a 18-25 °C del colorante de viabilidad fijable ViaKrome 405

Estabilidad a temperatura ambiente del reactivo ViaKrome 405

Estabilidad a 18-25 °C del colorante de viabilidad fijable ViaKrome 561

Estabilidad a temperatura ambiente del reactivo ViaKrome 561

Estabilidad a 18-25 °C del colorante de viabilidad fijable ViaKrome 638

Estabilidad a temperatura ambiente del reactivo ViaKrome 638

Estabilidad a 18-25 °C del colorante de viabilidad fijable ViaKrome 808

Estabilidad a temperatura ambiente del reactivo ViaKrome 808

Estabilidad de la solución concentrada. El colorante de viabilidad fijable ViaKrome indicado se reconstituyó en PBS y se utilizó de inmediato (0 horas) o se almacenó a 18-25 °C durante el tiempo indicado hasta 4 días (96 horas) protegido de la luz.  Se realizó una mezcla de células Jurkat y de células Jurkat estresadas por calor (55 °C durante 10 minutos), y los datos se adquirieron en un citómetro de flujo CytoFLEX LX.  El gráfico muestra el porcentaje de células muertas (barras) y la relación señal-ruido (línea) de cada punto temporal.  Ambas mediciones permanecen consistentes durante el periodo estudiado.

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